侵襲性真菌病是臨床常見(jiàn)的感染類型，其發(fā)病率在器官移植受體、惡性腫瘤等免疫受抑制患者中高達(dá) 20%-40%,也日益成為此類患者的重要死亡原因。
侵襲性肺真菌病臨床表現(xiàn)不典型易被基礎(chǔ)疾病所掩蓋，確診通常需要侵入性的組織標(biāo)本，而侵入性的操作過(guò)程常因患者的病情所限難以實(shí)施。因此有較高的漏診率。目前國(guó)內(nèi)大多數(shù)醫(yī)院都在開展非侵襲性實(shí)驗(yàn)室技術(shù)如G試驗(yàn)和GM試驗(yàn)，成為真菌感染的診斷標(biāo)準(zhǔn)之一，以提高真菌感染的陽(yáng)性率。但G試驗(yàn)、GM試驗(yàn)在診斷真菌感染中究竟有多大意義？?jī)烧哂泻螀^(qū)別？
一、什么是G試驗(yàn)、GM試驗(yàn)？
1、G試驗(yàn)：又稱1,3-β-D葡聚糖試驗(yàn)，檢測(cè)的是真菌的細(xì)胞壁成分1,3-β-D葡聚糖，人體的吞噬細(xì)胞吞噬真菌后，能持續(xù)釋放該物質(zhì)，使血液及體液中含量增高。1,3-β-D葡聚糖可特異性激活鱟變形細(xì)胞裂解物中的G因子，引起裂解物凝固，故稱G試驗(yàn)。
2、GM試驗(yàn)：檢測(cè)的是半乳甘露聚糖（glactomannan,GM），半乳甘露聚糖是廣泛存在于曲霉和青霉細(xì)胞壁的一種多糖，菌細(xì)胞壁表面菌絲生長(zhǎng)時(shí)，半乳甘露聚糖從薄弱的菌絲頂端釋放，是最早釋放的抗原，可以通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法進(jìn)行檢測(cè)。
二、兩者在診斷真菌感染中的意義
根據(jù)侵襲性肺真菌病診斷指南，真菌感染的診斷因素包括宿主因素、臨床特征、微生物學(xué)檢查、組織病理學(xué)。確診疾病必須依賴組織病理等有創(chuàng)檢查和操作，培養(yǎng)過(guò)程又需要一定時(shí)間，從而無(wú)形中增加了漏診率，而新的血清學(xué)診斷方法，包括G試驗(yàn)、GM試驗(yàn)以及對(duì)于真菌特異DNA的PCR技術(shù)，與臨床征象、微生物培養(yǎng)，尤其是CT掃描一起，為開始搶先治療、監(jiān)測(cè)疾病病程、評(píng)價(jià)治療反應(yīng)提供了更多有參考價(jià)值的資料。其中G試驗(yàn)、GM試驗(yàn)連續(xù)2次陽(yáng)性為有意義的檢查結(jié)果。
人體的吞噬細(xì)胞吞噬真菌后， 能持續(xù)釋放1,3-β-D葡聚糖，使血液及體液中含量增高。通過(guò) G 試驗(yàn)檢測(cè)1,3-β-D葡聚糖的含量能夠及時(shí)反映真菌感染情況。G試驗(yàn)適用于除隱球菌和接合菌（毛霉菌）外的所有深部真菌感染的早期診斷，雖能測(cè)得包括曲霉和念珠菌在內(nèi)的更多致病性真菌，且初步的臨床研究顯示有較好的敏感性和特異性，假陽(yáng)性率較低，但它只能提示有無(wú)真菌侵襲性感染，并不能確定為何種真菌感染，這是此方法的缺陷。
同時(shí)以下情況可出現(xiàn)假陽(yáng)性：（1）使用纖維素膜進(jìn)行血透，標(biāo)本或患者暴露于紗布或其他含有葡聚糖的材料；（2）靜脈輸注免疫球蛋白、白蛋白、凝血因子或血液制品；（3）鏈球菌血癥；（4）操作者處理標(biāo)本時(shí)存在污染。另外，使用多糖類抗癌藥物、放化療造成的粘膜損傷導(dǎo)致食物中的葡聚糖或定植的念珠菌經(jīng)胃腸道進(jìn)入血液等也可能造成假陽(yáng)性。
GM試驗(yàn)主要針對(duì)于侵襲性曲霉菌感染的早期診斷。曲霉菌感染部位主要集中在肺部，從而引起肺部侵襲性曲霉，診斷曲霉菌在肺部是定植還是侵襲性生長(zhǎng)，關(guān)鍵在于其是否合成GM.如果痰液或肺泡灌洗液標(biāo)本培養(yǎng)到曲霉菌 且GM試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，即可診斷為曲霉菌侵襲性感染。GM試驗(yàn)常可在患者臨床癥狀出現(xiàn)前5-8d獲得陽(yáng)性結(jié)果，并可對(duì)血清、腦脊液、肺泡或支氣管灌洗液進(jìn)行檢測(cè)，因而往往可以使診斷提前。所以GM試驗(yàn)是診斷侵 襲性曲霉感染的微生物檢查證據(jù)之一，通過(guò)檢測(cè)GM值也可以作為治療效 果的參考指標(biāo)之一。
GM試驗(yàn)對(duì)其他真菌檢測(cè)無(wú)效，且敏感性和特異性受諸多因素影響，以下情況可出現(xiàn)假陽(yáng)性：（1）使用使用半合成青霉素尤其是哌拉西林/他唑巴坦；（2）新生兒和兒童；（3）血液透析；（4）自身免疫性肝炎等；（5）食用可能含有GM的牛奶等高蛋白食物和污染的大米等。以下情況可出現(xiàn)假陰性：（1）釋放入血循環(huán)中的曲霉GM（包括甘露聚糖）并不持續(xù)存在而是會(huì)很快清除；（2）以前使用了抗真菌藥物；（3）病情不嚴(yán)重；（4）非粒細(xì)胞缺乏的患者。
三、臨床應(yīng)用注意
（1）G 試驗(yàn)和 GM 試驗(yàn)檢測(cè)的物質(zhì)不同，代謝規(guī)律存在差異，影響因素也有較大差別，二者不能互相取代。二者聯(lián)合應(yīng)用可以提高對(duì)侵襲性真菌病的診斷能力。
（2）GM 試驗(yàn)和G試驗(yàn)均存在假陽(yáng)性結(jié)果，可以通過(guò)多次檢測(cè)來(lái)降低假陽(yáng)性率。因此，G 試驗(yàn)和 GM 試驗(yàn)陽(yáng)性的病例仍需結(jié)合臨床表現(xiàn)綜合判斷是否存在真菌感染。
（3）我國(guó)的侵襲性真菌病指南把連續(xù) 2 次 GM 陽(yáng)性作為微生物感染的標(biāo)準(zhǔn)，臨床上經(jīng)驗(yàn)性治療早期應(yīng)用，會(huì)使血清 GM 濃度降低，出現(xiàn)假陰性，連續(xù) 2次血清 GM 陽(yáng)性的標(biāo)準(zhǔn)不易達(dá)到，會(huì)給臨床醫(yī)生帶來(lái)困惑。
（4）影響 GM 試驗(yàn)結(jié)果最常見(jiàn)的因素為 β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物的使用，尤其是哌拉西林/他唑巴坦，因此在檢測(cè)曲霉菌半乳甘露聚糖時(shí)，應(yīng)避免給患者使用此類藥物。